Pasażowanie komórek
Pasażowanie komórek to kluczowa technika w hodowli komórek somatycznych, która jest niezbędna do utrzymania ich zdrowia i funkcji. Proces ten pozwala na przeniesienie komórek z jednego naczynia hodowlanego do nowego, zawierającego świeżą pożywkę, co zapobiega ich zapełnieniu i śmierci. Stosunek pasażowania określa, ile nowych naczyń otrzymuje komórki z jednego naczynia, na przykład w stosunku 1:5. Dzięki tej metodzie możliwe jest nieprzerwane hodowanie kolejnych pokoleń identycznych komórek.
Pasażowanie komórek zwierzęcych
Komórki zwierzęce mogą być hodowane w dwóch głównych formach: jako komórki zawiesinowe (np. limfocyty) lub przylegające (np. komórki śródbłonka).
- Pasażowanie komórek zawiesinowych: Polega na zebraniu komórek z naczynia, ich zwirowaniu (przeciążenie około 200 g przez 5-10 minut), a następnie rozproszeniu w większej ilości pożywki i przeniesieniu do nowych naczyń.
- Pasażowanie komórek przylegających: Znane jako trypsynizacja, wykorzystuje enzym trypsynę (0,25%) do oddzielenia komórek od podłoża. Po usunięciu komórek dodaje się pożywkę z inhibitorem trypsyny, aby chronić komórki przed uszkodzeniem. Po kilku godzinach komórki przylegają ponownie do powierzchni naczyń.
Pasażowanie komórek jest istotnym krokiem w biotechnologii, umożliwiającym długoterminowe badania i produkcję komórek w laboratoriach.
